植物基因组DNA提取试剂盒是一种专门用于从植物组织中提取DNA的试剂盒。其中,CTAB粗提法是其中的一种基本方法。下面,我们将详细介绍这种方法的操作步骤。
首先,准备样品。将植物样品切碎成小块,放入离心管中,加入适量的液氮冷冻粉和研磨珠,用研磨器对样品进行研磨。研磨后,加入适量的CTAB提取缓冲液,混匀后放入65℃水浴中孵育30分钟。
接着,进行蛋白质沉淀。将孵育后的样品加入等体积的氯仿,轻轻摇晃混匀后静置10分钟,待两相分离后,用吸管将上层水相吸出放入新的离心管中,加入异丙醇混匀后离心10分钟,收集上层DNA含量高的异丙醇相。
然后,进行DNA沉淀。将异丙醇相加入等体积的冷乙醇中,缓慢翻转混匀后静置10分钟,待DNA逐渐沉淀后,用吸管将上层液体倒掉,用70%的乙醇洗涤沉淀后的DNA,并用离心机将DNA干燥。
最后,再溶解DNA。将干燥后的DNA沉淀加入适量的TE缓冲液中,轻轻摇晃混匀后放入65℃水浴中孵育10分钟,最后用离心机离心去除残留物质即可得到高质量的植物基因组DNA。
总之,CTAB粗提法是一种简单易行、成本较低的植物基因组DNA提取方法,适用于各种不同类型的植物组织。在操作过程中,需要注意材料的消毒和无菌操作,以保证提取到的DNA质量和数量。